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大鼠脑性瘫痪模型的构建

脑性瘫痪：

   脑性瘫痪（Cerebral palsy，CP）简称脑瘫，是围产期胎儿中枢神经系统损伤引起的一种非进行性功能障碍，主要表现为中枢性运动障碍及姿势异常，伴有智力低下、癫痫、语言障碍等并发障碍。建立成功的瘫痪模型可为其发病机制的探索，治疗手段的研究提供有效的手段。

实验材料

8-10周龄SD孕鼠

脂多糖

密闭缺氧箱

体积分数为 8%和 92%氧气、氮气的混合气体

构建方法

1. 孕16d母鼠给予500 μg/kg脂多糖腹腔注射，4 h后置于密闭缺氧箱中，予体积分数为8%和92%的氧氮气混合气体2.5h。隔天进行1次，直至分娩；

2.  幼鼠生后第7天麻醉，碘伏消毒后，在手术显微镜下于颈正中做一长0.5cm 的纵行切口，然后分离皮下组织和浅筋膜等，以丝线双重结扎右侧颈总动脉并离断，最后缝合颈部皮肤切口。

实验结果

1.一般情况观察：包括体重、皮肤颜色及每日活动量等；

2.幼鼠神经功能缺损评分(modified-neunrological severity score，mNSS) ；

3.旷场实验：记录幼鼠2min爬行距离和停顿次数；

4.病理切片验证：幼鼠术后7d心脏灌注后断头，取脑组织做HE染色切片，可见白质与灰质、海马区界限不清，海马区无规整紧实排列的单层神经元细胞层，神经元数量少，发育不成熟等特点。

评价标准

1.有效性评价：

（1）神经功能缺损评分（mNSS）越高，说明模型引起的神经功能缺损越明显。

（2）旷场实验结果显示爬行距离减少、停顿次数增加，说明模型对幼鼠运动能力和行为有影响。

2.特异性评价：

病理切片验证显示脑组织结构异常、神经元数量减少等病理特征，与脑性瘫痪的病理特征相符。

3.稳定性评价：

重复实验结果具有一致性和稳定性，即不同实验之间的数据变异较小。

4.伦理评价：

确保实验过程符合动物实验伦理规范，保护动物的权益和福利。

5.数据分析和结果解读：

（1）数据需进行统计学分析，确保结果具有统计学意义。

（2）结果解读应基于实验数据，提出科学合理的结论，并讨论模型的局限性和可能的改进方向。

通过以上详细方案和评价标准，可以构建出更科学严谨的脑性瘫痪动物模型，并对其进行全面的评估和验证，为该疾病的病理机制研究和治疗手段开发提供可靠的实验基础。