小鼠关节炎造模SOP

一、实验材料

牛二型胶原(北京博蕾德技术发展有限公司,20022

CFA (北京博蕾德技术发展有限公司,7008

二、实验方法

1、将牛二型胶原溶于0.05M醋酸中,终浓度2-4mg/ml,温和搅拌,4℃过夜。

2、将牛二型胶原醋酸溶液与CFA等量混合并乳化,乳化使用高速搅拌器,冰浴搅拌CFA和胶原溶液,一般搅拌3次,30000rpm/3min。保证乳化液滴入水中成团不散开。

3、初次免疫:小鼠尾根注射0.1ml乳液。从尾根部2cm处插入针头,针尖距离尾根0.5cm注射。

4、二次免疫:第21天,小鼠尾根再次注射0.1ml乳液。从尾根部2cm处插入针头,针尖距离尾根0.5cm注射。

5、一般在二次免疫后7-12天,模型组小鼠80%以上会出现关节炎症状。根据小鼠关节红肿程度和活动状态进行临床评分。在实验前和实验后的第35712天分别观察记录。

评分标准:

得分

发病情况

0

正常

1

脚部皮肤发红,无明显肿胀

2

轻度的踝关节、腕关节发红、肿胀

3

踝关节或腕关节中度发红肿胀

4

脚趾及关节红肿严重,强直或畸形


三、实验结果

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