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高效液相色谱仪
   
 

高效液相色谱是色谱法的一个重要分支,以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测,从而实现对试样的分析。

应用范围:中药(复方)中相关成分的含量测定、中药(复方)指纹图谱、血浆、尿液等生物样品中相关成分的检测。

 

实验流程:
1、样品前处理:
(a)中药样品:将中药样品使用溶剂溶解后,12000 r·min-1离心5 min。取上清液进样分析;
(b)血浆(血清)、尿液:取一定体积的样品,进行蛋白沉淀(甲醇、乙腈等)、液-液萃取(乙酸乙酯、乙醚等),涡旋振摇3 min,12000 r·min-1离心5 min。取上清液,氮气流吹干,复溶,12000 r·min-1离心5 min,取上清液进样分析。
(c)粪便或其他组织样品:将粪便或其他组织样品匀浆后,参照(b)进行处理
2、色谱条件优化:
(a)更换流动相:改变有机相(甲醇/乙腈)-缓冲盐(不同比例的甲酸、磷酸)的比例,从而使得不同分析物在色谱柱上分离,同时保持良好的峰形。
(b)更换波长:通过全波长扫描结合不同分析物的特性,选择最佳检测波长,使得分析物的检测灵敏度最佳。
(c)更换色谱柱:针对不同种类的分析物,使用不同类型的色谱柱,使得分析物在色谱柱上有良好的保留,同时分离度良好(R≥1.5)。
3、方法学确证:针对不同的检测项目(中药含量测定、生物样品中的药物检测等),依据不同的相关法律、法规,对精密度、准确度、稳定性、线性等方法学项目进行确证,保证检测结果的准确性、可信性、重复性。
4、检测及数据分析。
 
服务说明及结果:
1.客户提供:
药品:中药提取液、中药冻干粉等
血浆或血清:大于100 μL(需提供一定体积的空白血浆)
尿液:大于500 μL(需提供一定体积的空白尿液)
粪便或其他组织样品:10~100 mg
2.公司提供:基本实验步骤、样品前处理、检测结果、数据处理过程及原始数据。
3.实验周期:25~30个工作日。

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