按照 1 比 4 的比例在 1X PBS 中稀释，制成 4% 甲醛溶液。00003.封闭缓冲液：：准备 10 ml 缓冲液，添加 0.5 ml 与二抗同一物种来源的正常血清并混匀。搅拌时加入 30 l Triton X-100。00002.封闭标本时，按照数据表中推荐的稀释比例，在抗体稀释缓冲液中配制一抗。00007.00008.用抗体稀释缓冲液将荧光物质标记的二抗稀释后，室温下避光孵育标本 1–2 小时。

免疫共沉淀是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的方法。用预先固化在beads上的蛋白质A的抗体免疫沉淀A蛋白，那么与A蛋白在体内结合的蛋白质B也能一起沉淀下来，再通过蛋白变性分离，对B蛋白进行检测，进而证明两者间的相互作用。

1、免疫共沉淀（Co-IP）实验目的蛋白高背景产生的原因及处理方法?目的蛋白高背景产生的原因有很多种，比如：(2)有非特异性蛋白结合(2)转移膜上的非特异性吸附针对有非特异性蛋白结合这种情况，我们可以在无血清培养液中裂解细胞，而对于转移摸上的非特异性吸附，我们就要注意实验的操作问题，一定要戴手套，用镊子夹取，以及不接触转移膜转移面。2、免疫共沉淀（Co-IP）实验失败的原因及处理方法。答：（1）样品被蛋白酶降解，应对措施：裂解样品中加入蛋白酶抑制剂，注意冰上操作，避免反复冻融；（2）抗体浓度太低，应对措施：调整抗体浓

agomir与普通的微RNA模拟物相比，具有更高的稳定性和活性，更易通过细胞膜和组织间隙，富集于靶细胞。因此，agomir可以用于体内实验，通过注射、吸入或喂食等方式给予动物，观察微RNA对生理和病理过程的影响。这些修饰可以提高agomir的稳定性，防止被核酸酶降解，增强其与细胞膜的亲和力，促进其进入细胞。

目前引物合成基本采用固相亚磷酰胺三酯法。所有非必须有机化合物被移除的过程通常叫做脱盐。脱盐或OPC纯化的寡核苷酸可能达不到要求，则HPLC纯化被广泛地用于这个目的。根据实验需要，确定订购引物的纯度级别。加入尿素的目的一是变性，二是增加样品比重，容易加样。

高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。取上清液，氮气流吹干，复溶，12000 r·min-1离心5 min，取上清液进样分析。