在细胞实验中，如何提高细胞冻存后的复苏存活率？细胞冻存后复苏的存活率，直接影响后续实验的质量和可靠性。提高细胞冻存后的复苏存活率可以从我冻存、复苏以及后处理三个方面进行优化。一、冻存阶段 1.选择合适的冻存液：最常见：90% FBS + 10% DMSO有些细胞（如干细胞）推荐使用商业化冻存液（如StemCell BankIt、Gibco Recovery™）2.细胞状态要好：冻存前最好处于对数生长期，活力高死细胞或过度融合的细胞难以复苏3.细胞浓度合适：推荐密度：1×10⁶～5×10⁶ cells/mL，太稀不易成活，太密会营养竞争4.降温速度要慢

大鼠脂肪干细胞的分离 将手术切取的大鼠脂肪组织尽量剪碎后移至离心管，其余步骤与人脂肪干细胞的分离一致。增加胶原酶的量和消化时间也无法避免，取材时的毛细血管或脂肪间结缔组织未被完全消化，穿过细胞筛进入了培养瓶并沉淀于瓶底部形成的。

但是由于电击法和磷酸钙法的实验条件控制较严、难度较大；病毒法的前期准备较复杂、而且可能对于细胞有较大影响；所以现在对于很多普通细胞系，一般的瞬时转染方法多采用脂质体法。本次实验采用的脂质体是promega公司的TransFast脂质体试剂，它是一种阳离子脂质体和中性脂质体的混合物，是对于本次实验中采用的293T细胞优化的转染试剂。

细胞周期是指细胞从一次分裂完成开始到下一次分裂结束所经历的全过程，分为G0/G1期、S期、G2/M期。在科研实践中，很多实验具有对细胞群体的周期分布进行检测的需求。细胞群体周期测定的方法有很多种，最常用的是PI渗入DNA进行染色，然后通过流式细胞仪检测PI从而测定细胞群体的周期分布。

使用不同孔径的聚碳酸酯膜transwell小室放入培养板中，将肿瘤细胞接种于小室中，利用培养液成分的差异诱导细胞运动，检测细胞的迁移和侵袭能力的差异。

司自建有标准的细胞培养房，配备有生物安全柜、超净工作台、细胞三气培养箱、二氧化碳细胞培养箱、荧光倒置显微镜、体视镜、酶标仪、流式细胞仪等设备。细胞组技术人员毕业于东南大学、华中科技大学等知名高校生物学相关专业，具有硕士研究生以上学历，熟练掌握细胞学相关实验，可开展多种细胞实验。