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小鼠关节炎造模SOP一、实验材料 牛二型胶原(北京博蕾德技术发展有限公司,20022) CFA (北京博蕾德技术发展有限公司,7008) 二、实验方法 1、将牛二型胶原溶于0.05M醋酸中,终浓度2-4mg/ml,温和搅拌,4℃过夜。 2、将牛二型胶原醋酸溶液与CFA等量混合并乳化,乳化使用高速搅拌器,冰浴搅拌CFA和胶原溶液,一般搅拌3次,30000rpm/3min。保证乳化液滴入水中成团不散开。 3、初次免疫:小鼠尾根注射0.1ml乳液。从尾根部2cm处插入针头,针尖距离尾根0.5cm注射。 4、二次免疫:第21天,小鼠尾根再次注射0.1ml乳液。从尾根部2cm处插入针头,针尖距离尾根0.5cm注射。 5、一般在二次免疫后7-12天,模型组小鼠80%以上会出现关节炎症状。根据小鼠关节红肿程度和活动状态进行临床评分。在实验前和实验后的第3、5、7、12天分别观察记录。 评分标准:
三、实验结果
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