一、固定1、固定的意义：固定的目的是使蛋白质等成分凝固，及时固定可使组织结构或细胞形态更接近生活状态。同时，固定可使组织硬化成形，便于后续的包埋、切片以及染色。因此，固定是实验病理学制片技术中非常重要的环节。2、固定剂选择固定剂种类较多，但目前没有通用于能使所有被固定的细胞、组织成分都达到最佳固定效果的固定剂。目前应用范围最广的是10%中性甲醛溶液和4%多聚甲醛。3、固定方法（1）浸泡固定取出待检组织浸泡于固定液中，固定液必须足量，一般是组织块总体积的50倍，固定时间一般为48-72h，保证固定液充分渗入组织。（

扫描电镜是介于透射电镜和光学显微镜之间的一种微观形貌观察手段，利用极狭窄的电子束去扫描样品，通过电子束与样品的相互作用产生各种效应从而微观成像，其成像富有立体感，利用扫描电镜我们可直接观察各种样品表面的细微结构。

大鼠胸主动脉茜素红染色茜素红S(Alizarin Red S)钙染色法是一种旨在通过鳌和技术，使钙离子和茜素红S产生复合物，来分析固定处理的细胞样本中橘红色钙沉积现象的权威而经典的技术方法。主要适用于动物原生代或培养细胞的钙沉积和钙化结节检测。广泛用于骨细胞或组织病理生理的研究。

普鲁士蓝染色（Prussian blue reaction）又称为含铁血黄素染色，即经过亚铁氰化钾和稀酸处理后可以产生蓝色，常见于吞噬细胞内会间质内，主要显示三价铁盐。Perls 普鲁士蓝是非常经典的组织化学反应，是显示组织内三价铁的一种敏感、传统优良的方法，其染色原理为：亚铁氰化钾溶液使三价铁离子从蛋白质中被稀盐酸分离出来，三价铁与亚铁氰化钾反应，生成一种不溶解的蓝色化合物即三价铁的亚铁氰化物普鲁士蓝，所以该反应被称为普鲁士蓝反应。三价铁的亚铁氰化物是一种很稳定的化合物，在反应后可用红色染色剂进行复染，如核固红、伊红、中

大鼠脑海马区域尼氏染色尼氏染色法(Nissl Staining)是用碱性染料染神经组织的一种方法。尼氏体是胞质内的一种嗜碱性物质，广泛见于各种神经元，不同神经元中的尼氏体形状、大小和数量则各有差异。用于尼氏染色的碱性染料主要有焦油紫、亚甲蓝、甲苯胺蓝和硫堇等。我室主要用焦油紫和硫堇染色。尼氏染色法可以染出尼氏体，用来观察神经元内的细胞结构；还可以通过尼氏染色后对尼氏体的观察来了解神经元的损伤情况。

各组小鼠肾脏α-sma表达差异各组肾脏α-sma蛋白表达IOD值（x ±s，n=3）项目N组D组D+M组N+M组α-sma2993±32477648±1378037758±45032741±780免疫组化技术是一种综合定性、定位和定量；形态、机能和代谢密切结合为一体的研究和检测技术。在原位检测出病原的同时，还能观察到组织病变与该病原的关系，确认受染细胞类型，从而有助于了解疾病的发病机理和病理过程。免疫酶组化技术是通过共价键将酶连接在抗体上，制成酶标抗体，再借酶对底物的特异催化作用，生成有色的不溶性产物或具有一定电子密度的颗粒，于普通显微镜或电镜下进行细胞表