细胞迁移与侵袭实验将Transwell小室放入培养板中,小室内称上室,培养板内称下室,上下层培养液以聚碳酸酯膜相隔,将研究的细胞种在上室内,由于聚碳酸酯膜有通透性,下层培养液中的成分可以影响到上室内的细胞,应用不同孔径和经过不同处理的聚碳酸酯膜,就可以进行共培养、细胞趋化、细胞迁移、细胞侵袭等多种方面的研究。
细胞培养中常见的生物污染包括细菌污染、霉菌污染、支原体污染、黑点污染、真菌污染和原生动物污染。这些污染在细胞培养中的特点及相应的解决办法如下:1.细菌污染细菌在普通倒置显微镜下呈黑色和细砂状。通常,黑点污染后,细胞生长良好,运动物体无明显增加,培养基的颜色和透明度无明显变化。
划痕边缘的细胞会逐渐进入空白区域使“划痕”愈合。划痕实验在一定程度上模拟了体内细胞迁移的过程,是研究细胞迁移的体外试验方法中最简单的方法。
流式细胞分选流式细胞分选是在流式细胞术检测细胞表型的基础上,使用充电分选技术以实现多种特定表型细胞的分离。分选型流式细胞仪一般由液流系统、光路系统、检测分析系统和分选系统4部分组成。细胞分选方法的选择对于流式细胞分选与免疫磁性细胞分选,不同的分选方式各有优势不能互相取代。
细胞冻存的步骤:配制含 10%DMSO 或甘油、10~20% 小牛血清的冻存培养液;取对数生长期的细胞,去除旧培养液,用 PBS 清洗。关于细胞冻存的注意事项:1. 为保持细胞最大存活率,一般都采用慢冻存融的方法。
使用脂质体将 DNA 带入不同类型的真核细胞,与其它方法相比,有较高的效率和较好的重复性。中性脂质体是利用脂质膜包裹 DNA,借助脂质膜将 DNA 导入细胞膜内。DNA/脂质体复合物制备转染细胞同前 、 步骤。